2018년 케임브리지 국제 줄기세포 심포지엄에서 자체 개발한 무혈청 배지(HELENE Medium)의 연구 성과를 발표하였습니다. 첫째, HELENE Medium은 다른 시판 배지보다 동일한 기간 동안 더 많은 세포를 배양할 수 있다는 점입니다. 둘째, HELENE Medium으로 배양한 중간엽 줄기세포의 크기가 가장 작다는 점입니다. 줄기세포의 크기가 작을수록 섬유아세포로 분화하기 어렵다는 학술적 근거가 있습니다.
위의 2개의 특징을 종합하여 귀 뒤에서 채취한 지방조직에는 MSC가 포함되어 있는 것이 확인되었습니다. 채취한 지방의 양은 대퇴부나 복부와 비교하면 적지만, 당사의 독자적인 실험실 기술과 HELENE Medium에 의해, 1개월에 최대 22.5억개의 MSC를 배양할 수 있습니다.
본원이 환자분들께 제공하는 줄기세포의 품질을 보증하기 위해, 본 품질증명서와 동일한 공정으로 제조된 줄기세포 샘플 시험을 외부 전문 기관에 위탁하였습니다. 본 시험은 GMP(우수의약품제조및품질관리기준) 및 재생의료 GLP(우수실험실운영기준)를 준수하였으며, 독자적으로 설계된 3가지 실험을 포함한 검사입니다. 본원은 이와 동등한 검사를 자체 연구실(자사 랩)에서 철저히 실시한 후 세포를 제공하고 있으며, 제3자 검사기관을 통해 환자분들께 제공되는 줄기세포의 품질을 공정하게 검증받은 결과 또한 여기에 기재합니다.
샘플 제공자 3인의 지방 조직을 본원 연구실(Lab)에서 배양한 후 검증을 의뢰(송검)했습니다. 샘플은 귀 뒷부분에서 채취한 조직으로, 특수 기술과 전용 효소를 사용하여 조직을 분리 및 분해합니다. 단일 세포 상태로 분리한 후 1개월간의 배양 기간을 거쳐, 규정 수량에 도달한 세포를 MACS(자성활성세포분리법)로 분리하였습니다. 이후 셀 카운터(세포 계수기)를 통해 세포 수를 확인한 뒤, 제3자 독립 검사기관인 타카라바이오 주식회사에 제공하였습니다.
| 시험 목적 | 시험명 | 시험검체 | 결과 |
|---|---|---|---|
| 감염, 오염 | 무균 시험 (일본약전 직접법 옵션: 방법의 적합성 시험) |
QC_AL Lot:#13349 | 음성 |
| 무균시험 （일본약전 직접법） |
QC_AL Lot:#13349 | 음성 | |
| 마이코플라스마 부정 시험 (일본약전 참고정보 PCR법(7균종 소외 확인 있음)) |
QC_AL Lot:#13349 | 음성 | |
| 엔도톡신 시험 （일본약전 키네틱-비탁법 옵션: 반응간섭인자 시험） |
QC_AL Lot:#13349 | 음성 | |
| 엔도톡신 시험 (일본약전 키네틱-비탁법) |
QC_AL Lot:#13349 | 검출 한계 미만 | |
| 종양화 | 콜로니 형성 시험 | QC_AL Lot:#13349 | 음성 |
| 줄기세포 확인 | FCM 시험 (CD45-CD105+) |
QC_AL Lot:#13349 | CD45- 92.1％ CD105+ 100% |
위 이미지는 지방 조직의 예시 그림입니다. 콩처럼 둥근 물체가 지방 조직입니다. 줄기세포는 ‘줄기세포 미세환경’이라고 불리는 섬유질 그물망 같은 부분에 존재합니다. 즉, 줄기세포는 지방 세포 안에 있는 것이 아니라, 그 주변의 섬유질 구조 안에 존재합니다.
그럼, 귀 뒤 지방과 복부 지방의 차이점에 대해 정리해 보겠습니다.
| 귀뒤 지방 | 복부 피하 지방 | |
| 외관 사진 |  |
 |
| 그림 |  |
 |
| 통증 | 적음 | 강함 (타박과 비슷한 통증) |
| 내출혈 | 매우 드뭄 | 많음 |
| 압박 | 반창고에 의한 압박 | 거즈 압박 |
지방 유래 세포는 노란색 지방 세포 안에 있는 것이 아니라, 지방 세포 주변의 섬유질 조직(=줄기세포 미세환경)에 존재합니다.
복부 지방과 귀 뒤쪽 지방 모두에 줄기세포가 존재하지만, “지방 세포가 적고 주변 섬유질 조직이 많은 지방”일수록 줄기세포의 비율이 높습니다.
헬레네에서는 환자분의 통증 부담이 적은 귀 뒤쪽 지방을 주로 채취하고 있습니다.
다만 복부 지방 채취를 원하시는 경우에는 복부 지방흡입을 통해서도 채취가 가능합니다.
HELENE Cell Center에서 배양한 줄기세포는 환자분께 투여되기 전, 줄기세포 수와 생존율을 확인하기 위해 최소 2단계에 걸쳐 측정됩니다. 측정 결과는 배양실에서 승인된 후 출력됩니다. 모든 환자분께 과학적이고 책임 있는 방식으로 제공하고 있습니다.
세포 샘플을 채취한 후, 살아있는 세포와 죽은 세포를 구별하는 데 자주 사용되는 생체 염색제인 0.4% 타이판 블루 용액을 첨가하여 염색을 실시합니다. 염색 방법은 색소 배제 시험으로, 염색액이 죽은 세포에는 침투하지만 살아있는 세포의 세포막에 의해 차단된다는 점을 이용하여 생존율을 산출하기 위한 구별을 실시합니다. 기존에는 염색된 샘플을 현미경으로 관찰하여 수작업으로 카운트했으나, 자동화 셀을 사용하여 투과 반응을 자동으로 인식하고 분석을 완료합니다. 수동으로 계수할 경우 초점을 수동으로 맞출 뿐만 아니라, 샘플 간의 명시야 광량도 조정해야 합니다. Countess II FL 자동 셀 카운터는 조명과 초점을 자동으로 조정하여 사용 시 최적의 화질을 얻을 수 있습니다.
Countess II FL로 세포 수를 측정한 후, 본원의 Cell Center에서는 세포 샘플을 슬라이드에 올리고 ZEISS Axio Vert.A1 현미경으로 세포 이미지를 취득합니다. 이후 HELENE가 독자적으로 개발한 이미지 판독용 AI 프로그램을 사용하여 공초점 수준으로 세포 골격을 관찰하고, 현미경의 초점 거리, 세포 종류(MSC), 세포 배양 플라스크의 단면적을 종합하여 세포 수와 세포 생존율을 산출합니다. 이 두 단계의 측정 과정을 통해 계산 정확도를 매우 높은 수준으로 향상시키고 있으며, 다른 곳에서 쉽게 모방하기 어려운 정교한 프로세스를 실현하고 있습니다. 이를 통해 HELENE 브랜드의 치료용 등급 줄기세포가 환자분의 필요에 맞게 정확하고, 항상 최적화된 상태로 제공될 수 있도록 관리하고 있습니다.
HELENE 클리닉에서는 치료 시마다 줄기세포 증명서를 제공하여, 품질과 투명성에 대해 책임 있는 자세로 임하고 있음을 보여드리고 있습니다.
2021년 논문 【The safety of MSC therapy over the past 15 years: a meta-analysis】에 따르면, 국제적으로 저명한 학술지 「Lancet」에 게재된 임상시험을 포함하여 총 62건의 연구가 분석 대상으로 선정되었습니다. 이들 임상시험에서는 5억 개 이상, 경우에 따라 10억 개에 달하는 MSC가 투여된 사례도 포함되어 있으며, 이를 통해 HELENE 클리닉이 세계적 연구기관에 준하는 수준의 기술력을 갖추고 있음을 확인할 수 있었습니다.
| Author | Year | Location | Dose | |
|---|---|---|---|---|
| Hess | 2017 | USA | 1200×106 cells | 12억개 줄기세포 |
| Bartunek | 2013 | Belgium | 600 -1200×106 cells | 6-12억개 줄기세포 |
| Chanbers | 2017 | Australia | 1×109 cells | 10억개 줄기세포 / 폐장애 |
| Steinberg | 2017 | USA | 1×109 cells | 10억개 줄기세포 / 뇌졸중 |
| Igresias | 2021 | Mexico | 1×109 cells | 10억개 줄기세포 / 폐장애 |
| Matsuoka | 2024 | Japan | 1-2×109 cells | 20억개 줄기세포 / AntiAging |
다수의 임상 데이터를 살펴보면, 특정 질환에 대해 저용량의 세포를 투여한 사례를 확인하기 어렵다는 점에서, 경우에 따라 저용량 MSC의 유효성이 충분하지 않을 가능성도 시사됩니다. 향후 과학적 데이터와 연구가 업데이트됨에 따라, 관련 임상시험 결과를 보다 정확하게 비교하기 위해서는 MSC 치료 프로토콜, 치료 대상, 세포 공급원, 배양 프로토콜, 투여량의 차이 등을 지속적으로 개선하고 표준화해 나갈 필요가 있습니다. 이에 앞서 HELENE Clinic은 환자분의 연령, 건강 상태, 질환에 따라 세포 및 엑소좀의 재투여 프로그램을 다르게 설계하고, 안전성을 최우선으로 하면서 보다 나은 줄기세포 치료를 제공할 수 있도록 치료 방법을 지속적으로 개선해 나가겠습니다.
[인용] The safety of MSC therapy over the past 15 years: a meta-analysis.
https://doi.org/10.1186/s13287-021-02609-x
| 진료 시간 | 10:00～19:00 |
|---|---|
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